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- 基于高效液相色谱的西湖龙井茶鉴别方法
- 作者： 赵明明， 周有祥， 金钰， 胡定金， 严伟 来源：《湖北农业科学》 年份：2016 文献类型 ：期刊 关键词： 西湖龙井茶 高效液相色谱 主成分分析 产地鉴别
- 描述：通过高效液相色谱法分析50份龙井茶叶样品中21个特征峰,利用主成分分析,建立区分西湖龙井(XHLJ)与非西湖区龙井茶(NXHLJ)的方法。结果表明,通过主成分分析,提取出3个主成分,累计贡献率为91.3%,21个特征峰中EGCG和CAF的影响因素相对较大。
- 全文：基于高效液相色谱的西湖龙井茶鉴别方法_赵明明.pdf
- 基于氨基酸特征分析的西湖龙井茶鉴别方法研究
- 作者： 赵明明， 金钰， 胡筱波， 胡定金， 周有祥 来源：《湖北农业科学》 年份：2015 文献类型 ：期刊 关键词： 龙井茶 氨基酸 叙述性统计 主成分分析
- 描述： 通过酸水解方法检测50份龙井茶叶样品中氨基酸的含量,以相对氨基酸含量为指标,通过主成分分析,建立区分西湖龙井(XHLJ)与非西湖区龙井茶(NXHLJ)的方法。结果表明,通过主成分分析,提取出3个主成分,累计贡献率为75.7%,Glu、Arg、Phe和Tyr的影响相对较大。因此,酸水解氨基酸对龙井茶的地域初步区分有一定的作用。
- 全文：基于氨基酸特征分析的西湖龙井茶鉴别方法研究赵明明1，金 钰2，胡筱波2，胡定金1，周有祥1（1．湖北省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，武汉 430064；2．华中农业大学食品科学技术学院，武汉 430070）摘要：通过酸水解方法检测50份龙井茶叶样品中氨基酸的含量，以相对氨基酸含量为指标，通过主成分分析，建立区分西湖龙井（XHLJ）与非西湖区龙井茶（NXHLJ）的方法。结果表明，通过主成分分析，提取出3个主成分，累计贡献率为75．7%，Glu、Arg、Phe和Tyr的影响相对较大。因此，酸水解氨基酸对龙井茶的地域初步区分有一定的作用。关键词：龙井茶；氨基酸；叙述性统计；主成分分析西湖龙井茶是一种扁形绿茶，是中国历史名茶之一，有着上千年的历史。2008年，国家颁布的标准［1］明确规定了龙井茶的品种、产地及加工方法，标准指出仅特定品种（龙井43、龙井群体、龙井长叶、迎霜等）在特定产区（西湖、越州、钱塘）经一系列加工方法得到的产品才是龙井茶，而西湖龙井茶，必须源于杭州西湖区不到50 km2的范围内［2］。由于西湖龙井独特的气味、口味和有限的产量，其价格远远高于普通绿茶，因而市面上出现了大量以假当真、以次充好的产品，其中以外地龙井茶冒充西湖产区龙井茶为主。由于传统辨识方法（以为视觉、味觉判断为主）［3，4］缺乏客观性，所以亟需建立一个科学准确的分析化学方法来追溯龙井茶叶产地。目前，已有许多关于茶叶品种鉴别、产地追溯的研究，主要利用近红外［5］、色谱［6，7］、质谱［8］等分析技术，结合主成分分析、判别分析、聚类分析等统计分析方法［9－11］，建立有效的区分方法。本试验首次以酸水解氨基酸为研究对象，通过液相色谱方法分析来自不同区域的龙井茶叶样品，对其进行统计分析，以期建立基于氨基酸的龙井茶叶产地溯源方法。1 材料与方法1．1 材料共采集样品50个，其中28个采自西湖产区，22个样品采自非西湖产区，所有茶均为扁形茶，具备龙井的表观特征。17种氨基酸混合标样购自国家标准物质中心。1．2 仪器L－8800全自动氨基酸分析仪（日本，日立）。1．3 方法1．3．1 样品测定 参照GB／T 5009．124－2003［12］方法，将样品粉碎后过20目筛，称取0．100 0 g于玻璃水解管中，加入12 mL 6 mol／L盐酸，真空封口，于110℃水解22～24 h，冷却后定容至100 mL，过滤。取1 mL滤液于65℃水浴中蒸干，残留物用0．02 mol／L HCl定容至2 mL，0．22μm微孔滤膜过滤后，上机分析。1．3．2 数据处理 样品经酸水解得到17种氨基酸，通过与标准品的比较确认。17个峰在进行统计分析前，经过标准化处理，以氨基酸占总量的百分比得到相对含量，构建数据库。采用SPSS软件进行样品的叙述性统计和主成分分析。2 结果与分析2．1 样品的氨基酸含量分析样品经过全自动氨基酸分析仪得到色谱图（图1），经标准品定量，可知龙井茶叶样品中水解氨基酸的总含量在18%～24%之间。17种氨基酸分别为Asp、Thr、Ser、Glu、Gly、Ala、Cys、Val、Met、Ile、Leu、Tyr、Phe、Ly、His、Arg、Pro。由于Cys的相对含量过低（＜1%），故而分析过程中删去Cys。所有样品中，Glu含量最高，其次是Asp和Gly。通过SPSS软件对数据进行描述性统计分析（图2），部分氨基酸在50个样品间的差异性较大，根据方差分析得到Glu（1．8）、Arg（0．30）、Asp（0．14）和Phe（0．10）对样品间的差异贡献率可能较高；而方差较低的Ala和His则贡献率可能较低。为了进一步验证该结果，主成分分析被应用于该数据的统计分析。图1 茶叶样品酸水解氨基酸色谱分析注：（A）检测波长为570 nm，Peaks：1．Asp，2．Thr，3．Ser，4．Glu，5．Gly，6．Ala，7．Val，8．Met，9．Ile，10．Leu，11．Tyr，12．Phe，13．Lys，14．His，15．Arg；（B）检测波长为440 nm。图2 茶叶样品酸水解氨基酸相对含量2．2 龙井茶的主成分分析图3 龙井茶叶样品主成分分析注：A．3D得分矩阵图；B．载荷矩阵图主成分分析能有效提取特定数据库中重要变量的多元统计分析方法。对50个样本的酸水解氨基酸数据进行主成分分析，共提取3个主成分（图3A），累计贡献率为75．7%。所有的样品大致可以分为两个区域，XHLJ和NXHLJ。从图3B中可以发现，在第一主成分的构成中，16个氨基酸对主成分得分值影响较大的因子为Glu；在第二主成分的构成中，影响较大的为Arg、Phe和Tyr。这与描述性统计中得到的方差较大的氨基酸基本吻合。同时结合图3A和图3B可知，西湖龙井中Arg相对含量较高，而Phe和Tyr的相对含量较低。在数据的分析过程中，还发现西湖龙井茶叶样品中的甜味氨基酸（Ser、Ala、Gly、Pro和Thr）高于其他区域的样品，这很可能与西湖龙井拥有独特滋味有关。3 结论试验以水解氨基酸为研究对象而非游离氨基酸，主要原因一是游离氨基酸含量过低（＜5%），并且绝大部分为茶氨酸；二是水解氨基酸主要由蛋白质水解得到，能在一定程度上反映蛋白质的构成情况。试验结果表明，以氨基酸相对含量为数据库进行统计分析的方法能初步区分西湖龙井茶与其他产区的龙井茶，并且找到了特征氨基酸Glu、Arg、Phe和Tyr。参考文献：［1］GB／T 18650－2008，地理标志产品龙井茶［S］．［2］王丽鸳，成 浩，贺 巍，等．不同产区龙井茶相似性及线性判别［J］．浙江林业科技，2014（2）：18－23．［3］肖 宏．基于电子舌技术的龙井茶滋味品质检测研究［D］．杭州：浙江大学，2010．［4］程 焕，贺 玮，赵 镭，等．红茶与绿茶感官品质与其化学组分的相关性［J］．农业工程学报，2012（S1）：375－380．［5］周 健，成 浩，贺 巍，等．基于近红外的PLS量化模型鉴定西湖龙井真伪的研究［J］．光谱学与光谱分析，2009，29（5）：1251－1254．［6］MA T，HUANG C，MENG X，et al．Fingerprint analysis of hawk－tea by high－performance liquid chromatography［J］．Food Chemistry，2011（2）：551－556．［7］WANG Y X，QING LI，QIAN W，et al．Simultaneous determination of seven bioactive components in oolong tea C amellia sinensis：Quality control by chemical composition and HPLC fingerprints［J］．Journal of Agricultural and Food Chemistry，2012（60）：256-260．［8］LIN J，ZHANG P，PAN Z，et al．Discrimination of oolong tea（Camellia sinensis）varieties based on feature extraction and selection from aromatic profiles analysed by HS－SPME／GC-MS［J］．Food Chemistry，2013（1）：259－265．［9］何 昱，洪筱坤，王智华．33批茶多酚高效液相色谱指纹图谱的质量控制研究［J］．中国药学杂志，2006（2）：139－143．［10］WANG L，WEI K，CHENG H，et al．Geographical tracing of X ihu L ongjing tea using high performance liquid chromatography［J］．Food Chemistry，2014（146）：98－103．［11］HE Y，LI X L，DENG X F．Discrimination of varieties of tea using near infrared spectroscopy by principal component analysis and BP model［J］．Journal of Food Engineering，2007（79）：1238-1242．［12］GB／T 5009.124－2003，食品中氨基酸的测定方法［S］．Study on the Identification of West Lake Longjing Tea with Amino AcidsZHAO Ming－ming1，JIN Yu2，HU Xiao－bo2，HU Ding－jin1，ZHOU You－xiang1（1．Institute of Quality Standard and Testing Technology for Agro－Products，Hubei Academy of Agricultural Sciences，Wuhan 430064，China；2．College of Food Science and Technology，Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，China）Abstract：The contents of amino acids in 50 Longjing tea samples were measured after hydrolyzing by hydrochloric acid．Then the West Lake Longjing and non－West Lake Longjing were differentiated based on the relative contents of amino acids which were analyzed by principal component analysis（PCA）．The results showed that 3PCs could be extracted，the cumulative contribution rate was 75．7%，and the most important factors were Glu，Arg，Phe and Tyr．Consequently，amino acids may play a role in the geographical tracing of Longjing tea．Key words：Longjing tea；amino acids：descriptive statistics analysis；principal component analysis．中图分类号：S571．1；Q517文献标识码：A文章编号：0439－8114（2015）24－6369－03DOI：10．14088／j．cnki．issn0439－8114．2015．24．071收稿日期：2015－10－15基金项目：公益性行业（农业）科研专项（S201203046）；湖北省农业科学院青年科学基金项目（2013NKYJJ20）作者简介：赵明明（1987－），女，湖北武汉人，助理研究员，主要从事食品安全和品质分析研究工作，（电话）027－87389736（电子信箱）hdzmm＠163．com；通信作者，周有祥（1979－），男，副研究员，主要从事食品安全及品质分析研究，（电话）027－87389765（电子信箱）zhouyouxiang＠gmail．com。（责任编辑 龙小玲）