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- 不同种类基肥对西湖龙井茶品质的影响
- 作者： 郑旭霞， 黄海涛， 敖存， 崔宏春， 毛宇骁， 余继忠 来源：《安徽农业科学》 年份：2014 文献类型 ：期刊 关键词： 茶树 施肥 物候期 品质 产量
- 描述：[目的]为指导西湖茶区合理施肥提供依据。[方法]在西湖龙井茶区连续3年开展氨基酸有机肥、复合肥、菜饼等3种不同基肥比较试验。[结果]有机肥能提高春茶产量,显著增加春茶氨基酸、水浸出物含量,其中菜饼效果最明显。[结论]该研究认为龙井茶园基肥年施菜籽饼3 750~4 500 kg/hm2为宜。
- 全文：不同种类基肥对西湖龙井茶品质的影响郑旭霞，黄海涛，敖存，崔宏春，毛宇骁，余继忠*(杭州市农业科学研究院茶叶所，浙江杭州 310024)摘要 ［目的］为指导西湖茶区合理施肥提供依据。［方法］在西湖龙井茶区连续3年开展氨基酸有机肥、复合肥、菜饼等3种不同基肥比较试验。［结果］有机肥能提高春茶产量，显著增加春茶氨基酸、水浸出物含量，其中菜饼效果最明显。［结论］该研究认为龙井茶园基肥年施菜籽饼3 750～4 500 kg/hm2为宜。关键词 茶树;施肥;物候期;品质;产量西湖龙井茶以“色绿、香郁、味甘、形美”著称于世，蜚声海内外，为中国名茶之首。对西湖龙井茶主产地梅家坞、龙井、灵隐、双峰、梵村、叶埠桥和龙门坎等的调查表明，该地每年茶园的肥料投入成本在9 000～21 000元/hm2之间，肥料以菜饼、复合肥和商品有机肥为主［1－2］。近年来，受经济利益驱使和劳动力短缺的影响，肥料种类从菜饼向复合肥转变，施肥量和成本越来越高，不仅导致面源污染，而且对茶叶品质有一定的影响［3］。笔者探讨了不同肥料种类对春茶物候期、龙井茶品质、产量的影响，为指导西湖茶区合理施肥提供依据。1 材料与方法1.1 试验茶园 试验地位于杭州市西湖区转塘街道杭州市农业科学院茶叶所西湖龙井茶基地，地势平坦。处理前土壤肥力状况为pH 4.4、有机质含量1.07%、全氮含量0.12%、有效钾含量54.64 mg/kg。供试茶树品种为龙井群体种，树龄约25年。每年5月下旬离地40 cm重修剪留养，10月深修剪15 cm，且开沟20 cm施基肥。历来采摘春茶制龙井茶。1.2 试验设计 设1个对照，3个处理，3次重复，共计12个小区。每个小区的面积为27 m2(4.5 m×6.0 m)，小区采用随机区组排列。试验肥料为压榨菜饼(淳安榨油厂生产)、45%高浓度复合肥(罗马尼亚生产)、氨基酸有机肥(河南莲花味精有限公司生产，由粮食发酵提取氨基酸后下脚料加工)3种，对照为空白不施肥。根据2010年市场价格，以12 000元/hm2肥料成本统一计算各处理使用量，每年10月作基肥用，于2010、2011和2012年连施3年。供试肥料使用前检测有机质和全氮含量、氨基酸有机肥有机质含量为15.17%，全氮含量为6.45%;菜饼有机质含量为44.34%，全氮含量为6.40%;复合肥N、P、K含量各为15%。各处理肥料使用量见表1。表1 各处理肥料用量1.3 试验调查与数据统计 在每年春茶期间，在每个小区选择5个同等大小的腋芽挂牌，每隔1 d调查一次营养芽物候期;以一芽二叶的采摘标准，记录鲜叶产量;采摘一芽二叶，用微波炉杀青、干燥，制成生化样，测定生化组分;制采摘一芽二叶手工加工龙井茶样，感官审评茶叶品质。用SAS进行数据统计和方差分析，用Tukey法进行多重比较和检验。2 结果与分析2.1 不同种类基肥对春茶物候期的影响 由表2可知，在3年的春茶试验期间，2012年3月持续的低温阴雨天气导致春茶整体开采时间比正常年份推迟7 d左右，2011、2013年气候情况正常。连续3年的结果表明，氨基酸有机肥作基肥对茶树物候期几乎没有影响，与对照相当;复合肥处理在2012年除一芽一叶期和二叶期甚至略迟于对照外，均与对照相当;菜饼处理可以明显提早茶树物候期，其中鱼叶期连续3年均提早2～4 d，一芽一叶、一芽二叶、一芽三叶除2012年外其他均比对照提早。这说明在正常气候条件下，施用菜饼有利于茶叶的提前开采。2.2 不同种类基肥对春茶生化成分的影响 采摘春茶第一批一芽二叶，制作生化样。由表3可知，2011、2013年氨基酸有机肥和菜饼处理水浸出物含量均在0.05水平显著高于对照，但两者之间各有高低;但是，2012年度各处理间无显著性差异。这可能是由2012年春茶前期长期阴雨天气所致。施用复合肥与对照间差异不显著。这说明有机肥可以明显提高春茶水浸出物含量，复合肥对水浸出物含量的影响不明显。表2 不同肥料与春茶物候期的关系注:+表示比CK早;－表示比CK迟;0表示和CK相同。表3 不同处理对春茶生化样水浸出物含量的影响 %注:同列不同大小写字母分别表示在0.01、0.05水平差异显著。由表4可知，除2013年复合肥处理茶多酚含量明显低于对照外，其他均较对照无显著性差异。综合3年的检测结果，整体来说，施肥会降低春茶茶多酚含量，而且施用复合肥的差异更显著。这和李磊［4］的研究结果相一致。表4 不同处理对春茶生化样茶多酚的影响 %注:同列不同大小写字母分别表示在0.01、0.05水平差异显著。由表5可知，各基肥处理均能在0.05水平显著增加春茶氨基酸含量，菜饼处理差异最明显，连续3年均在0.01水平显著高于对照，说明施肥可以提高春茶鲜叶氨基酸含量，增加茶叶的鲜爽度，且以施用菜饼效果最显著。表5 不同处理对春茶生化样游离氨基酸的影响 %注:同列不同大小写字母分别表示在0.01、0.05水平差异显著。由表6可知，2012、2013年菜饼处理咖啡碱含量均在0.05水平显著低于对照，2011年较对照无显著差异;氨基酸有机肥处理3年检测结果均高于对照，复合肥处理3年检测各有高低，但都没达到显著差异。这说明不同基肥对春茶咖啡碱含量有一定的影响，其中菜饼更明显。表6 不同处理对春茶生化样咖啡碱的影响 %注:同列不同大小写字母分别表示在0.01、0.05水平差异显著。2.3 不同种类基肥对西湖龙井茶品质的影响 连续3年采摘春茶第一批一芽二叶手工制成西湖龙井茶，由农业部茶叶质量检验检测中心和浙江大学茶学系感官审评。审评总分差异在1分以内的，表明各处理品质很接近;总分相差在1～2分的，品质有差异，但不明显。由表7～9可知，不同处理与对照以及处理间对春茶品质差异均不明显。原因一是可能西湖龙井茶为手工加工，虽然由同一个工人加工，但不能保证完全一致;二是试验茶树为有性系的龙井群体种，茶树个体之间有差异;三是西湖龙井茶一年只采春茶1次，茶树通过夏秋季养蓬、冬季休眠连续十多个月的休养生息，不施肥已能满足茶树所需的各种营养元素，故施肥对春茶的品质作用已显示不出。2.4 不同种类基肥对西湖龙井茶产量的影响 由表10可知，施基肥能增加春茶的产量，且随着每年的肥料施入，各处理产量比对照的增加幅度逐年加大。其中，氨基酸有机肥处理和菜饼处理的增加幅度比复合肥处理更大，说明施用缓效型的有机肥能持续增加春茶产量。表7 2011年不同处理对春茶感官品质的影响表8 2012年不同处理对春茶感官品质的影响表9 2013年不同处理对春茶感官品质的影响表10 3年不同种类基肥对西湖龙井茶产量的影响 g3 结论与讨论施肥能提高春茶产量和品质，但是速效类肥料如复合肥对春茶产量、品质增加的帮助不大，而菜饼这种缓慢分解的有机肥能持续不断地为茶树提供营养，减少养分流失，对提早茶树物候期、提高春茶鲜叶产量及春茶氨基酸、水浸出物的含量、减少咖啡碱含量具有明显作用，有利于茶园提前开采，提高春茶品质。研究表明，成年龙井茶园基肥年施菜籽饼3 750～4 500 kg/hm2为宜。因试验采用西湖龙井茶原有栽培茶园，土壤肥力基础好。另外，试验品种为有性系品种，龙井茶手工加工工艺复杂。这些因素都可能会对试验结果产生影响，不能很好地显示各处理所起的应有效应，在下步研究中有待改善。参考文献［1］许允文.龙井茶的栽培管理技术［J］.中国茶叶，2000(3):6 －8.［2］郑旭霞，余继忠，姜新兵，等.西湖龙井茶一级产区施肥现状及建议［J］.茶叶，2013，39(2):97 －100.［3］韩文炎，李强.茶园施肥现状与无公害茶园施肥技术［J］.中国茶叶，2002，24(6):29 －31.［4］李磊.不同肥料处理对茶树生长和茶叶品质的影响［D］.济南:山东农业大学，2010.Study on Effects of Different Kinds of Basic Fertilizers on the Quality of West Lake Longjing TeaZHENG Xu-xia，YU Ji-zhong et al (Tea Research Institute of Hangzhou Academy of Agricultural Sciences，Hangzhou，Zhejiang 310024)Abstract ［Objective］The aim was to provide the basis for rational fertilization in West Lake tea area.［Method］Three years comparison of three different kinds of basic fertilizers，amino acid organic fertilizer，inorganic compound fertilizer and rape-seed cake fertilizer test were carried out in West Lake Longjing tea garden［Result］The results showed that organic fertilizer could improve the yield，and significantly increase the contents of amino acid and water extracts of spring tea，especially for cake fertilizer.［Conclusion］The recommended content of cake fertilizer as basic fertilizer for West Lake Longjing tea garden was 3 750 －4 500 kg/hm2.Key words Tea plant;Basic fertilizer;Phenological phase;Quality;Yield中图分类号 S571文献标识码A文章编号0517－6611(2014)23－07857－03DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2014.23.061基金项目 杭州市重大科技创新专项(20112312A02);国家茶叶产业技术体系(CARS-23)。作者简介 郑旭霞(1969－)，女，浙江金华人，高级农艺师，从事茶树育种方面的研究。*通讯作者，研究员，从事茶树育种方面的研究。收稿日期 2014-07-08
- HPLC-DAD测定大茶树和小茶树的西湖龙井茶中EGCG的含量
- 作者： 蒲首丞， 潘立新， 叶玲仙， 陆方明 来源：《安徽农业科学》 年份：2014 文献类型 ：期刊 关键词： HPLC-DAD 西湖龙井茶 表没食子儿茶素没食子酸酯 含量
- 描述：(2%乙酸)15∶85;流速:1.0 ml/min;检测波长:276 nm;柱温:35℃。[结果]EGCG线性范围为0.152~3.040μg,相关系数r为1,平均回收率97.61%,RSD为6.61%。[结论]该方法精密度、准确度良好,稳定性高,能简便、快速地测定大小茶树的西湖龙井茶中的EGCG含量。
- 全文：HPLC-DAD测定大茶树和小茶树的西湖龙井茶中EGCG的含量蒲首丞，潘立新，叶玲仙，陆方明 (浙江海洋学院萧山科技学院，浙江杭州311231)摘要 ［目的］采用HPLC-DAD对西湖龙井茶中的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的含量变化进行分析。［方法］采用Agilent C18色谱柱(4.6 mm ×150 mm，5 μm)，流动相:甲醇∶水(2%乙酸)15∶85;流速:1.0 ml/min;检测波长:276 nm;柱温:35 ℃。［结果］EGCG线性范围为0.152～3.040 μg，相关系数r为1，平均回收率97.61%，RSD为6.61%。［结论］该方法精密度、准确度良好，稳定性高，能简便、快速地测定大小茶树的西湖龙井茶中的EGCG含量。关键词 HPLC-DAD;西湖龙井茶;表没食子儿茶素没食子酸酯;含量龙井茶位列我国十大名茶之一，具有1 200多年历史。西湖龙井茶产于浙江杭州西湖区［1］。儿茶素作为西湖龙井主要的生物活性成分之一，主要化合物包括表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)等［2-3］。EGCG是西湖龙井中含量较高的儿茶素，现代研究表明，EGCG具有显著的抗氧化、抗肿瘤、抗突变和心血管疾病等作用，能够提高人体免疫功能，抑制肿瘤的生长，抑制肝脂和胆固醇的增长，对金黄色葡萄球菌等细菌有极强的抑制作用［4-5］。西湖龙井的明前开山茶一直都是研究人员和茶叶加工企业关注的焦点，而且明前开山茶价格也十分昂贵。该研究采摘的西湖龙井茶为杭州西湖龙井茶原产地龙坞保护区的明前开山茶。目前对EGCG的分离提取及功效研究的文献较多，但对明前西湖龙井茶青叶中EGCG含量的研究鲜有文献报道。笔者通过对龙坞同一保护区的大茶树和小茶树的西湖龙井茶EGCG含量测定，为人们的实际需要提供参考，为以茶叶加工企业提供试验依据。1 材料与方法1.1 材料 研究对象:西湖龙井茶青叶，杭州龙坞明前采集。主要试剂:表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)，上海源叶公司，含量98%;甲醇为色谱纯试剂;其他试剂均为分析纯;试验用水为艾柯超纯水。主要仪器:Agilent1260型高效液相色谱仪，Agilent公司，包括DAD检测器，Agilent chem工作站;电子分析天平，赛多利斯;恒温水浴锅，精宏公司;真空干燥箱，天呈;RA-25AA旋转蒸发仪，上海亚荣。1.2 方法1.2.1 色谱条件。色谱柱为Agilent C18色谱柱(4.6 mm ×150 mm，5 μm)，流动相:甲醇∶水(2% 乙酸)15∶85;流速:1.0 ml/min;检测波长:276 nm;柱温:35℃。1.2.2 对照品溶液的制备。精密称取经真空干燥24 h处理后的15.2 mg表没食子儿茶素没食子酸酯对照品，置于100 ml容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液，于冰箱中低温保存备用。表没食子儿茶素没食子酸酯浓度为 152 μg/ml。1.2.3 供试品溶液的制备。分别准确称取样品约1.0 g，置于500 ml平底烧瓶中，加入100 ml 80℃水，置85℃的水浴中加热回流1 h，共水浴加热回流2次，经过滤收集滤液，最后减压浓缩滤液，定容至50 ml容量瓶中，摇匀，0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液待测。2 结果与分析2.1 目标组分的确定 按照“1.2”项色谱条件下，对照品溶液和供试品溶液分别进样10 μl，DAD检测器检测分析，在波长为276 nm下是EGCG的最大吸收，DAD检测器检测记录储存200～400 nm的所有色谱，对照品与样品茶的EGCG的保留时间都在8.3 min(图1)。2.2 流动相的选择 测定EGCG含量，流动相为甲醇∶水系统和甲醇∶水(2%乙酸)系统，进行对比试验发现，2个系统都能使EGCG分离开来(分离度R＞1.5)，甲醇∶水系统中EGCG严重拖尾，而甲醇∶水(2%乙酸)系统中EGCG峰形比较好，故选择甲醇∶水(2%乙酸)15∶85为该测定方法的流动相系统。2.3 线性关系试验 精密吸取上述对照品溶液分析，进样量分别为 2、4、6、8、10、12、16、20 μl，测其峰面积，以标准溶液的进样量X为横坐标，以峰面积Y为纵坐标作图，得到线性回归方程为Y=774.33X-10.585，相关系数为r为1，表明EGCG在0.152～3.040 μg范围内与峰面积之间线性关系良好。2.4 精密度试验 精密吸取“1.2.2”项配制的对照品溶液10 μl进样，依上述色谱条件测定，重复进样5次，测定EGCG峰面积，RSD为0.38%，结果表明，仪器具有较好的精密度。2.5 稳定性试验 分别取“1.2.3”项制备的大茶树青叶、小茶树青叶2 种供试样品溶液 10 μl，于 0、2、4、6、8、10 h 进样测定，各重复进样6次，测定目标组分的含量，以考察供试品溶液的稳定性，10 h大茶树茶和小茶树样品EGCG组分RSD分别为2.8%、3.1%。结果表明，供试品溶液在10 h内基本稳定。图1 对照品与样品HPLC色谱注:A.对照品;B.大茶树;C.小茶树;1.EGCG。2.6 加样回收试验 精密称取已知含量的茶样品6份，分别精密加入一定量EGCG对照品，按供试品溶液制备方法制备样品溶液，依上述色谱条件测定含量。结果显示，该方法具有较高的准确度(表1)。表1 回收率试验结果2.7 样品中EGCG含量的测定 按照“1.2.3”项制备3个大茶树和3个小茶树西湖龙井茶叶供试品溶液，按“1.2.1”项色谱条件进样测定，每样重复进样3次，求峰面积均值，按外标法计算其含量。大茶树中EGCG的含量为:14.151 mg/g(RSD 0.56%)，15.534 mg/g(RSD 0.66%)，13.526 mg/g(RSD 0.75%)，平均含量14.404 mg/g;小茶树中EGCG的含量为:8.645 mg/g(RSD 0.56%)，9.326 mg/g(RSD 0.59%)，8.957 mg/g(RSD 0.63%)，平均含量 8.976 mg/g。3 结论采用HPLC-DAD法对大茶树和小茶树的西湖龙井茶中的EGCG进行了含量分析，试验结果表明，大茶树西湖龙井茶青叶中EGCG平均含量为14.404 mg/g，含量较高;小茶树西湖龙井茶青叶中EGCG平均含量为8.976 mg/g，比大茶树含量低。该试验为人们选择茶叶原料提供参考，为企业对原料等级划分提供了试验依据。该测定茶中EGCG含量的方法操作简单、重现性好、分析结果准确可靠，可用于原料茶的质量控制。参考文献［1］张龙，王飞娟，潘家荣，等.近红外光谱和模式识别技术在西湖龙井与浙江龙井茶叶鉴别中的应用［J］.红外，2012，33(3):44-48.［2］卢涛，兰先秋，朱斌，等.不同茶多酚中儿茶素的测定及柱层析法提取EGCG 的比较［J］.化工进展，2008，27(5):746-752.［3］王霞，高丽娟，林炳昌.表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的分离与制备［J］.食品科学，2005，26(9):242-245.［4］梁晓岚，陈春林.茶多酚的研究进展［J］.茶叶科学技术，1994(1):6-8.［5］张瑜，邹国林，彭少君.表没食子儿茶素没食子酸酯研究进展［J］.氨基酸和生物资源，1998，20(4):51-54.Quantitative Determination of EGCG of West Lake Longjing Tea from Big Tea Tree and Small Tea Tree by HPLC-DADPU Shou-cheng et al (Xiaoshan School of Science and Technology，Zhejiang Ocean University，Hangzhou，Zhejiang 311231)Abstract ［Objective］HPLC-DAD is used to analyze the content of EGCG from West Lake Longjing tea in different periods.［Method］Agilent C18(4.6 mm ×150 mm，5 μm)is taken as the column，methanol solution and 2%acetic acid water solution(15∶85，V/V)as the mobile phase，the velocity o f flow is 1.0 ml/min，the column temperature is 35 ℃，the inspect wave length is 276 nm.［Result］The linear range of EGCG is 0.152-3.040 μg，r=1，the average rate of recovery is 97.61%and the RSD is 6.61%.［Conclusion］The method was precise，accurate，highly stable，simple，convenient and rapid for the quantitative determination of EGCG.Key words HPLC-DAD;West Lake Longjing tea;EGCG;Content中图分类号 S571文献标识码 A文章编号 0517-6611(2014)12-03714-02基金项目 浙江省教育厅项目(Y200908478)。作者简介 蒲首丞(1978-)，男，浙江杭州人，讲师，博士，从事天然产物化学研究。收稿日期 2014-04-04